霍亂的病原菌檢查有哪些步驟
霍亂是一種比較常見的腸道疾病,很大一部分是由于飲食不潔造成的,所以我們一定要注意飲食安全,不潔的食物一定不要吃,霍亂的病原菌檢查有哪些步驟呢?那么下面就跟著小編一起了解一下吧。
1、涂片染色 取糞便或早期培養(yǎng)物涂片作革蘭染色鏡檢,可見革蘭陰性稍彎曲的弧菌。
2、懸滴檢查 將新鮮糞便作懸滴或暗視野顯微鏡檢,可見運(yùn)動(dòng)活潑呈穿梭狀的弧菌。
3、制動(dòng)試驗(yàn) 取急性期病人的水樣糞便或堿性胨水增菌培養(yǎng)6小時(shí)左右的表層生長(zhǎng)物,先作暗視野顯微鏡檢,觀察動(dòng)力。如有穿梭樣運(yùn)動(dòng)物時(shí),則加入O1群多價(jià)血清一滴,若是O1群霍亂弧菌,由于抗原抗體作用,則凝集成塊,弧菌運(yùn)動(dòng)即停止。如加O1群血清后,不能制止運(yùn)動(dòng),應(yīng)再用O139血清重作試驗(yàn)。
4、增菌培養(yǎng) 所有懷疑霍亂患者糞便,除作顯微鏡檢外,均應(yīng)作增菌培養(yǎng)。留取使用抗菌藥物之前糞便,盡快送到實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。培養(yǎng)基一般用pH8.4的堿性蛋白胨水,36~37℃培養(yǎng)6~8小時(shí)后表面能形成菌膜。此時(shí)應(yīng)進(jìn)一步作分離培養(yǎng),并進(jìn)行動(dòng)力觀察和制動(dòng)試驗(yàn),這將有助于提高檢出率和早期診斷。 #p#霍亂#e#
5、分離培養(yǎng) 用慶大霉素瓊脂平皿或堿性瓊脂平板。前者為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基,在36~37℃條件下,培養(yǎng)8~10小時(shí)霍亂弧菌即可長(zhǎng)成小菌落。后者則需培養(yǎng)10~20小時(shí)。選擇可疑或典型菌落,應(yīng)用霍亂弧菌“O”抗原的抗血清作玻片凝集試驗(yàn)。
6、核酸檢測(cè) 通過PCR技術(shù)檢測(cè)霍亂弧菌毒素基因亞單位CtxA和毒素協(xié)同菌毛基因(TcpA)來區(qū)別霍亂菌株和非霍亂弧菌。然后根據(jù)TcpA基因的不同DNA序列來區(qū)別古典生物型和埃爾托生物型霍亂弧菌。4小時(shí)內(nèi)可獲結(jié)果,可檢出每毫升堿性蛋白胨水中10條以下霍亂弧菌。
通過以上內(nèi)容的講解,我們知道了有關(guān)上述疾病的知識(shí),我們要注意生活細(xì)節(jié),做好防護(hù)工作才能得到基本的安全保障。希望對(duì)您的健康有所幫助。
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